이온 배제 - Ion Exclusion
유기산 분석은 이것으로!
유기산 분석에 최적화 되어있습니다
일반적인 역상 크로마토그래피에서는 유기산 분석 시 컬럼 내부에서 오랜 시간 동안 머무르지 않고 빨리 용출되는 경향이 있어 분석에 어려운 점이 있습니다.
이러한 작용은 이동상 내부에서 유기산이 이온화(Negative charge)되어 Gel과의 배제 작용에 의한 현상입니다.
이러한 현상을 억제하기 위하여 이동상 내부에 염(salt)사용이 가능하며 염에 의해 functional group이 손상되지 않는 조합으로 SDB Gel과 Sulfo group(SO3H)이 조합된 컬럼이 개발되었습니다.
이러한 조합은 유기산의 해리를 억제함과 동시에 염을 사용할수 있는 충분한 내구성을 제공하여 일반적인 유기산 분석에 사용됩니다.
이온배제?
Gel에 결합되어있는 Sulfo functional group은 gel 주변을 negative charge 분위기로 만듭니다.
이러한 현상으로 gel 주변은 ‘Donnan Membrane’이 형성되며 이온배제 현상 역시 이 membrane안에서 일어나게 됩니다.
(Gel 구조)
이러한 구조는 샘플의 Electric charge에 따라 반발(Repulsion)이 생기게 됩니다.
① 분석을 위해서는 우선, 100% H2O환경에서는 유기산의 해리 현상( ex-유기산 HA가 H+와 A–로 이온화)이 일어나기 때문에 이를 억제해줄 약간의 염을 이동상에 첨가합니다.
② 중성(Neutral)샘플과 같은 경우에는 sulfo group과의 반발 현상 없이 membrane안으로 들어갈 수 있습니다. 약산(Weak acid)와 같은 경우에는 약간의 반발 현상(Weak Repulsion)현상이 생겨 중성 샘플 보다는 머무르는 시간이 적어지겠죠? 강산(Strong acid)의 경우 반발 현상이 심하게 일어나 (Strong Repulsion)가장 머무르는 시간이 짧을 것입니다.
이러한 원리로 일반적인 이온 배제 크로마토그래피의 샘플 용출 순서는 아래와 같습니다.
SUGAR SH Specification
(Gel : Styrenedivinylbenzene(SDB))
#USP L17, L22, #IEX+SEC
Ion Exclusion + SEC(크기 배제)를 동시에
SUGAR SH 컬럼은 약간의 Pore를 가지는 gel을 이용하여 일반 당류 + 유기산을 동시에 분석할 수 있게 만든 컬럼입니다.
■ 일반 당류 : SEC 모드로 분석
■ 유기산 : Ion Exclusion 모드로 분석
이러한 원리를 이용하여 우론산(uronic acid) 및 알돈산(aldonic acid)분석에 최적의 성능을 발휘합니다.
당류 및 유기산 분석 Retention table은 아래 자료를 참조해주시기 바랍니다
- 표준 컬럼
Product | Product name | Plate number | Functiona group | Exclusion Limit (Pullulan) | Particle size (μm) | Size (mm) |
F6378100 F6378104 | SUGAR SH1011 SUGAR SH1011-8C | ≥ 17,000 ≥ 17,000 | Sulfo Sulfo | 1,000 1,000 | 6 6 | 8.0 x 300 8.0 x 100 |
Product name | Max. usable | Recommended | Max. usable | Usable | Shipping |
SH1011 SH1011-8C | 5 1.5 | 0.5 to 1.0 0.5 to 1.0 | 1.5 1.5 | < 95 < 95 | H2O H2O |
* 컬럼을 지속적으로 사용하시다 보면 특정 요인에 의하여(샘플 혹은 이물질 등) Sulfo group에 결합되어있는 H+ 가 다른 이온으로 치환되는 경우가 발생할 수 있습니다. 이러한 상황에서 컬럼을 복구하기 위해 아래와 같은 방법을 수행할 수 있습니다.
① 25mM H2SO4 수용액 50mL 를 50℃, 0.5mL/min 조건으로 흘립니다.
RSpak KC Specification
(Gel : Styrenedivinylbenzene(SDB))
#USP L17, L22, #IEX+Reversed Phase, #포스트 컬럼법 사용시 높은 감도
Ion exclusion + Reversed phase를 동시에
RSpak KC 컬럼은 이온배제와 동시에 역상 분석 모드가 작용할 수 있게 gel을 가공하여 유기산, 시안화 이온 분석에 최적화 되어 있습니다.
또한 포스트 컬럼법(PCR)사용 시 높은 감도 및 선택성을 가지는 특성이 있으며 KC-811 6E 컬럼은 일본 물 공급법에 따른 시안화 이온 및 시안화 염소 분석에 적합합니다.
유기산 분석 Retention table은 아래 자료를 참조해주시기 바랍니다
- 표준 컬럼
Product | Product name | Plate number | Functiona group | Particle size (μm) | Size (mm) |
F6378030 | RSpak KC-811 | ≥ 17,000 | Sulfo | 6 | 8.0 x 300 |
Product name | Max. usable | Recommended | Usable | Shipping |
KC-811 | 5 | 1.5 | ≤ 85 | 0.1% H3PO4 aq. |
* 컬럼을 지속적으로 사용하시다 보면 특정 요인에 의하여(샘플 혹은 이물질 등) Sulfo group에 결합되어있는 H+ 가 다른 이온으로 치환되는 경우가 발생할 수 있습니다. 이러한 상황에서 컬럼을 복구하기 위해 아래와 같은 방법을 수행할 수 있습니다.
① 25mM H2SO4 수용액 50mL 를 50℃, 0.5mL/min 조건으로 흘립니다.